久久综合丝袜长腿丝袜-久久综合婷婷-久久综合偷拍-久久综合偷偷噜噜噜色-www.黄色在线-www.黄色在线观看

　　化妝品中的一些成分在吸收了太陽光后可能會產生光毒性，對皮膚產生損害，其臨床表現常為曬斑和水皰等皮膚狀況。化妝品的光毒性研究對人的皮膚健康具有至關重要的作用。

　　作為第三方檢測中心，中科測試機構擁有CMA和CNAS認證檢測資質，檢測設備齊全，數據科學可靠，可出具國家認可的化妝品光毒性試驗報告。

　　化妝品光毒性反應

　　化妝品光毒性指化妝品在太陽光或紫外線下，吸收紫外光的能量，然后在皮膚中釋放能量以致對皮膚造成損傷作用，對劑量有依賴性，當化合物在體內累積到一定劑量的時候，就會發生毒性反應。

　　化妝品發生皮膚光毒性反應需要有3個條件，首先化妝品必須能夠到達活細胞，以保證其能夠和活細胞進行有效接觸，再者就是發生光毒反應所需的光（紫外線或可見光）波長適當，能夠有效穿透皮膚，還有就是光敏物質能夠吸收反應發生所需的能量。

　　化妝品光毒性試驗體外替代方法

　　第一次歐洲替代法研究中心關于體外光毒性測試的專題研討會中，首次成功確立了體外光毒性測試的研究階段，同時，允許體外3T3中性紅成纖維細胞攝取光毒試驗在歐盟范圍內用于常規測試。但是這種體外細胞光毒性測試方法不能涉及到光毒性檢測的所有領域，歐洲化妝品，盥洗用品和香料協會和ESAC提出應該額外建立一些其它的覆蓋整個光毒性領域的體外光毒性體外試驗。隨著1999年第二次專題會議的召開和近年來相關科研工作者的研究，各種試驗方法相繼被發現。

　　到目前為止，傳統的光毒性試驗體外替代方法主要包括3T3中性紅成纖維細胞攝取光毒試驗、人重三維組皮膚模型、人體角骯細胞試驗和肝細胞試驗、光-紅細胞聯合試驗、酵母試驗和組氨酸光氧化試驗等。

　　雖然光毒性體外替代方法較多，但應用于化妝品方面的試驗方法還很有限。目前應用于化妝品方面的方法主要分為細胞模型和人工皮膚模型兩大類。

　　細胞模型光毒性體外替代試驗

　　1、3T3成纖維細胞中性紅攝取光毒試驗（3T3neutral red uptake phototoxicity assay，3T3 NRU PTassay）

　　3T3成纖維細胞中性紅攝取光毒性試驗（3T3NRU PT）是一個已經通過驗證的替代試驗方法（ECB.41，OECD 432），目前化妝品方面的光毒性體外檢測多數還是利用此種方法，其原理是中性紅染料被活細胞的溶酶體攝?。ㄆ鋽z取量與活細胞量直接相關），通過測定BALB/c 3T3成纖維細胞經化學物質和紫外線照射的聯合作用后的細胞存活率，判斷該化學物質是否具有光毒性。該方法能夠精確預測人體試驗結果的體外試驗。

　　2、光-紅細胞聯合試驗

　　光紅細胞聯合試驗包括光溶血（photohaemolysis test）和血紅蛋白光氧化試驗（haemoglobin photooxidation test）兩個試驗，其原理為光毒物質進入紅細胞內后接觸光線，促使細胞膜陽離子流出，脂質過氧化，蛋白交聯，形成甲基化血紅蛋白，細胞腫脹、破裂至溶血，形成“光動力學反應”。

　　目前，3T3中性紅成纖維細胞攝取光毒試驗作為唯一通過驗證的光毒性體外替代方法，應用面較廣而且相對于光-紅細胞聯合試驗，其準確度更高（光-紅細胞聯合試驗陰性率低，假陰性較多）。

　　人工皮膚模型光毒性體外替代試驗

　　1、EPISKIN

　　EpiSkin模型是由今天全球最大的化妝品公司之--歐萊雅生產，該公司對皮膚和人工皮膚模型一直在進行積極地研究，其皮膚研究中心坐落在法國歐奈蘇布瓦。

　　EpiSkin模型是由E.Tinois在1997年首次研制出來，就是在I型牛膠原基質上覆蓋上IV型人膠原，上面再放置培養13天、分化形成角質層的人角質細胞作為表皮。

　　在考察該模型是否適用光毒性檢測的研究中，將一些弱光毒性物質（6-甲基香豆素和氧氟沙星）的實驗效果與一種強光毒性物質（氯丙嗪）的效果進行了對比。SLS和磺異苯酮作為陰性對照品。讓模型接觸受事物1小時后，暴露在無致毒劑量的UVA照射之下。經過18小時后，進行MTT分析測試，確定釋放到培養基中的IL-1a量。經過UVA照射的光毒性化合物會使細胞死亡率上升，并且會使IL-1a釋放量增加，因此說明該模型具有辨別光毒性物質的能力。

　　2、SkinEthic

　　該公司位于法國尼斯，是Martin Rosdy在1992建立的，目的是為了開發和推銷人工皮膚模型除SkinEthic。除了開發人工皮膚，還開發等角膜、咽、牙齦、生殖道等人工上皮。

　　SkinEthic模型的總體皮膚結構與人類表皮有著很高的相似度，具有與人類皮膚一樣的角質層、顆粒層、棘細胞層。

　　SkinEthic模型的實驗數據通過與體內尚可研究的試驗數據作比較，得出該模型用于光毒性評價具有很好的相關性。

　　3、 EpiDerm

　　Epiderm是由美國阿什蘭MatTek公司生產的皮膚模型，在1993年投放市場，該公司還提供其他類型的模型，如含黑素細胞的重組皮膚、重組角膜上皮。Epiderm模型是在1994年由Cannon et al.首次發現的。該模型是用來源于常人皮膚的表皮角質細胞培養形成多層的高度分化的人表皮模型。其形態上與正常人表皮相似，包含基底層、棘層、顆粒層和一層內含細胞間質層的角質層。

　　Licbsch et al.將原來ZEBET（德國動物試驗替代方法制定和論證中心）提供的用SKIN2模型測試光毒性的實驗方案轉用到Epiderm模型上。實驗方法為將受試物以5種不同的濃度與與該模型接觸，然后分別在無致毒劑量的UVA、可見光和無致毒劑量的UVA、無光照兩種情況下評價其反應。在照射一天后，使用MTT分析法確定細胞毒性，表明該模型能夠正確而鑒別光毒性化合物。