400-133-6008
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2025-03-12
細菌總數升高常與有機物污染、病原體傳播相關，可作為陸源排污、養殖廢水等污染事件的生物指標。弧菌屬等條件致病菌的豐度與海產品安全直接相關，檢測結果為漁業資源管理提供科學依據。《海洋監測規范第7部分》（GB17378.7-2007）明確將細菌總數列為近海污染生態調查的核心指標。該指標通過量化單位體積水體中可培養細菌的數量，為海洋環境質量評估提供數據支撐。
中科檢測是第三方檢測機構，遵循GB17378.7-2007標準進行調查，可提供一系列近海環境污染的生物學調查、監測和評價服務，提供海洋細菌總數檢測服務，并出具權威報告。
細菌總數檢測的必要性
在海洋環境監測體系中，細菌總數是衡量近海生態健康與污染程度的關鍵指標。依據《海洋監測規范第7部分：近海污染生態調查和生物監測》（GB17378.7-2007），細菌總數檢測通過量化水體中細菌數量，為海洋環境管理提供科學依據。其必要性體現在：
1、污染程度指示：細菌總數升高常與陸源污染物、養殖廢水排放等導致的有機物污染相關，可直觀反映人類活動對海洋的影響。例如，生活污水與工業廢水排入近海，會促使細菌大量繁殖，通過檢測細菌總數，能及時發現污染事件。
2、生態系統健康評估：細菌作為海洋生態系統中的分解者與物質循環參與者，其數量變化影響碳、氮、磷等元素循環。監測細菌總數，可輔助判斷海洋生態系統的物質代謝是否正常，為生態修復提供數據支撐。
3、公共衛生安全保障：海洋細菌中的部分致病菌（如弧菌），會通過海產品危及人類健康。檢測細菌總數，能輔助評估漁業資源安全性，保障海產品質量，守護公眾飲食健康。
細菌總數檢測檢測方法詳解
標準中明確了兩種細菌總數檢測方法：平板計數法與熒光顯微鏡直接計數法，各有其技術特點與應用場景。
（一）平板計數法：經典的細菌定量技術
-方法原理：基于單一細菌在平板培養基上培養后形成肉眼可見菌落的特性（一個菌落代表一個細菌細胞），通過計算菌落數確定細菌數量。關鍵在于將樣品中細菌分散為單個細胞，制成均勻稀釋液，接種至固體培養基培養皿。
-測定步驟：
1.樣品處理：按100mL水樣加1mL吐溫溶液，搖勻分散細菌細胞。
2.梯度稀釋：無菌操作下，吸取1mL水樣注入9mL滅菌陳海水，依次連續稀釋至所需濃度，確保每平皿菌落數在30-300之間，每種稀釋度設3個平行樣。
3.接種培養：取0.1mL稀釋水樣滴入平皿，用滅菌玻璃刮棒涂抹均勻，靜置20-30分鐘使菌液滲入培養基，于25℃恒溫箱培養7天。
4.菌落計數：選擇菌落數30-300的平皿，若兩種稀釋度均在此范圍，按菌落數比值決定計數方式；若所有稀釋度菌落數均大于300或小于30，按對應規則選取稀釋度計算，最終以平均菌落數乘稀釋倍數得出細菌數。
（二）熒光顯微鏡直接計數法：快速檢測的優選方案
-方法原理：利用吖啶橙染色細菌，通過經伊拉克黑染色的微孔濾膜過濾，細菌截留在濾膜上。在熒光顯微鏡下，細菌發熒光綠，直接計數。適用于細菌量在103-10?個/mL的樣品，準確性高。
-測定步驟：
1.濾膜處理：取0.20μm微孔濾膜浸泡于伊拉克黑染色液4小時以上，無菌沖洗后貼于濾器，確保無氣泡。
2.染色過濾：搖勻水樣，吸取注入濾器，加吖啶橙染色液，染色3分鐘后負壓濾去染液，無菌水沖洗并抽干濾液。
3.觀察計數：將濾膜移至載玻片，滴浸油、蓋蓋玻片，在熒光顯微鏡油鏡下觀察，至少隨機計數20個視野，每視野細菌數30-50個為宜，最后計算樣品細菌含量。
（三）細菌總數檢測的質量控制要點
無論是平板計數法還是熒光顯微鏡直接計數法，質量控制貫穿檢測全程。平板計數法需注意無菌操作，避免環境雜菌污染；稀釋倍數選擇要精準，確保菌落數在有效計數范圍。熒光顯微鏡法中，濾膜處理、染色時間、觀察視野數等均需嚴格把控，保證計數準確性。此外，平行樣設置、空白對照等操作，也是確保檢測結果可靠的關鍵環節。
檢驗檢測認證服務機構。
整體技術解決方案。
